黄酮类化合物是存在于植物中的一类低分子次生代谢产物 。 近年来的研究表明 ， 黄酮类化合物具有广泛的生理功能 ， 如清除自由基、抗癌、抗氧化、抗病毒等生理活性和药理作用 ， 显示了黄酮化合物在医药及食品领域具有广阔的应用空间 。
芦笋是一种营养和药用价值均极高的蔬菜 。 分析表明 ， 芦笋中除含多种营养素外 ， 还含有抗氧化剂、细胞免疫激活剂以及细胞生长调节剂等物质 ， 这些成分包括皂苷、固醇、黄酮苷、异黄酮、含硫氨基酸、维生素类、糖类免疫激活剂以及锰、锌、铜、铁等微量矿物质圜 。 芦笋虽好 ， 但新鲜芦笋不宜保存 ， 存放3d一5d其新鲜度大幅度降低 ， 组织逐渐变硬并失去大量营养素 。 采用现代技术将新鲜芦笋制成芦笋茶 ， 不仅保留了原芦笋中的营养成分 ， 而且可以长期存放 。 目前 ， 对芦笋茶中黄酮类化合物的研究还较少 。 微波是一种高频电磁波 ， 具有很强的热效应 。 微波用于天然成分的提取 ， 具有选择性强、操作时间短、溶剂耗量小、目标组分得率高且能极大限度地保留分离组分的天然活性等优点 。 本实验以芦笋茶为原料 ， 探讨用微波法从芦笋茶中提取黄酮的最佳工艺 ， 并对提取物的抗氧化性进行研究 ， 为芦笋茶的开发利用提供了基础依据 。
1材料与方法
1.1主要原辅材料
芦笋茶：由国家农产品保鲜工程中心(天津)提供 。 芦丁 ， 亚硝酸钠 ， 硝酸铝 ， 无水乙醇 ， 硫酸亚铁 ， 三氯醋酸 ， 硫代巴比妥酸 ， 二苯代苦味肼基自由基(DPPH) ， 以上试剂均为分析纯 ， 购于天津市化学试剂公司 。
1.2主要仪器与设备
FW80微型高速万能试样粉碎机：上海长乐电器厂;VIS一7220型分光光度计：北京瑞利分析仪器公司;FA1104N型电子分析天平：上海精密科学仪器有限公司;LD5—2A型离心机：北京医用离心机厂;格兰仕微波炉：顺德格兰仕电器实业有限公司;HZS—H型水浴振荡器：哈尔滨市东联电子技术开发有限公司;79—1型磁力搅拌机：上虞市宏兴机械仪器实业公司 。
1-3实验方法
1.3.1提取工艺流程
芦笋茶一预处理一乙醇浸泡一微波处理一离心分离一取上清液一测定黄酮含量操作要点：芦笋茶过40目筛 ， 得到芦笋茶粉末 ， 备用 。 取芦笋茶粉用一定浓度的乙醇浸泡后 ， 再在微波条件下进行提取 ， 离心后取上清液 ， 测定其中黄酮的含量 ， 并计算黄酮得率 。
1.3-2单因素实验设计
基本实验条件：微波功率：中档(700W);加热时间：45s;料液比：1：20;乙醇浓度：70%;室温 。
1.3.2.1微波时间对黄酮得率的影响
按提取基本条件 ， 分别考察微波15s、30s.45s和60s时对黄酮提取得率的影响 。
1.3.2.2料液比对黄酮得率的影响
按提取基本条件 ， 分别考察料液比1：15、1：20、1：25和1：30时对黄酮提取得率的影响 。
1.3.2.3乙醇浓度对黄酮得率的影响按提取基本条件 ， 分别考察乙醇浓度为30%、50%、70%和90%时对黄酮提取得率的影响 。
1.3.3正交实验设计
利用正交实验进一步考察时间、料液比、乙醇浓度三个因素对提取效果的相互影响 。 实验选用L9(34)设计研究提取条件对提取效果影响的主要因素 ， 并确定最佳工艺 。 实验设计如表1 。
文章插图
表1正交实验因素及水平表
1.4指标测定
1.4.1芦丁标准曲线的绘制
精确吸取0.1mg/mL芦丁标准溶液0.0 ， 2.0 ， 4.0 ， 6.0 ， 8.0 ， 10.0mL于6个25mL比色管中 ， 用30%的乙醇补至10mL ， 加人1mL5%NaNO2 ， 摇匀 ， 放置6min后 ， 加人1mL10%A1(NO3)3 ， 再放置6min ， 加人10mL1moL/LNaOH ， 摇匀显色 ， 定容 ， 静置15min ， 以零管为空白 ， 在510nm处测定系列吸光度圄 。 用最小二乘法做线性回归 ， 求得芦丁浓度(Y)与吸光度(A)的关系曲线 。
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