微波提取芦笋茶黄酮工艺的研究.pdf( 二 ) _黄酮类化合物|抗氧化性|茶叶

1.4.2黄酮含量及黄酮得率的计算
黄酮含量(%)=(Yx25x25x25/Mx5x2xl000xl00%(1)
式中：Y —— 黄酮浓度(mg/mL)
25——样液稀释后的体积(mL)
M——原料质量(g)
5.2——吸取的样液量(mL)

文章插图

式(2)中芦笋茶中的总黄酮含量的测定：芦笋茶用70%乙醇浸润后，于80℃水浴浸提6h ，滤渣采用相同方法重复提取3次，将3次的提取液合并后测得的黄酮含量作为芦笋茶中的总黄酮含量。按此方法测得的总黄酮含量为3.74% 。
1.4.3芦笋茶中黄酮的抗氧化功能研究
1.4.3.1清除自由基的测定一DPPH法
DPPH是一种稳定的自由基，其乙醇溶液呈紫色，在517nm处有最大吸收。当在DPPH溶液中加入自由基清除剂后，溶液颜色变浅， 517nm处的吸收光度变小，且吸光度变小的程度与自由基被清除的程度呈线性关系，可用于检测自由基被清除的程度，从而评价物质的抗氧化能力。其能力用抑制率来表示，抑制率越大，抗氧化能力越强。配制不同黄酮浓度的样品液(见表2) ，并按下面的测量方法测定抑制率。

文章插图

表2黄酮样品液制备
精确吸取样品溶液2.0mL于试管中，加人2*10―4mol的DPPH溶液2.0mL ，摇匀，放置30min ，以80%乙醇为空白，分别测定517nm处的吸光度Ai 。同时，测定样品溶液2.0mL与2.0mL80%乙醇混合液517nm处的吸光度。再测定DPPH溶液2.0mL与乙醇2.0mL混合液517nm处的吸光度Ac 。每组平行测定3次，取平均值后根据以下公式计算样品抑制率：
抑制率=[1一(Ai—Aj)/Ac]×100%(3)
式中Ai—样品液与DPPH溶液混合液的吸光度;
Aj——样品液与乙醇混合液的吸光度;
Ac——DPPH溶液与乙醇混合液的吸光度。
1.4.3.2抗脂质过氧化活性的测定
黄酮类化合物是一类性能优良的天然食品抗氧化剂，本实验采用依赖鸡卵黄脂蛋白的脂质过氧化模型，测定样品抗脂质氧化能力。抑制率越大，则样品抗脂质过氧化能力越强。
操作步骤：新鲜卵黄用等体积的0.1mol/LpH7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)按1：1配成悬液，并按1：25倍稀释，磁力搅拌30min 。在试管中加入卵黄悬液0.4mL;并分别加入样品0.2mE(对照管PBS);再加入25mmo1的硫酸亚铁0.4mL;用0.1mol/LpH7.4PBS补至4.0mL ，置于37℃水浴振荡50min 。取出后加入20%三氯醋酸1mL ，静置10min后， 3000r/min离心15min ，取上清液4mL加入0.8%硫代巴比妥酸2mL ，塞紧管口100℃水浴15min ，空白管以PBS取代上清液，其余相同。 532nm测光吸收，平行测定3次，取平均值并根据公式
(4)计算样品抑制率：
抑制率%=(对照液吸光度一样品液吸光度)/对照液吸光度×100%(4)
2结果与讨论
2.1标准曲线(见图1)
用最小二乘法作线性回归得芦丁浓度与吸光度关系曲线的回归方程式：
Y=O.09712A+4.482×10R2=0.9998(5)
其中：Y为芦丁浓度(mg/mL);
A为吸光度值。