微波辅助水提取云南凤尾茶总黄酮工艺的研究凤尾茶(Elsholtzia bodinieri Vaniot) , 又名东紫苏、野山茶、凉茶、牙刷草、小香薷等 , 为唇形科香薷属一年生草本植物 , 生于山坡、路旁草丛中或灌木林下 。 主要分布在云南、甘肃、四川、青海等西部地区 , 是一种常用的民间中草药 。 其味甘苦微辛、性平 , 具有发散解表 , 理气和胃之功效 , 主治外感风寒、头身痛、咽喉痛、消化不良和肝炎等症 。 据本草考证 , 香薷属植物最早记载为药食兼用 , 后在应用中各有侧重而出现药食功能分离 。 凤尾茶是目前该属植物唯一保留食用功能的品种 。 滇南各少数民族由于喜食腥燥食物 , 常以凤尾茶作为日常茶饮 。 据报道 , 凤尾茶的化学成分主要含有黄酮类化合物、挥发油、萜类和甾体等 。 已有研究对凤尾茶总黄酮的提取均采用了有机溶剂乙醇 , 如胡浩斌等采用微波辅助流动萃取法对甘肃东紫苏中的黄酮类成分进行了提取和测定 , 确定了最佳提取工艺条件 , 证明根中的含量最高为133.7mg/g , 茎次之为78.51mg/g , 叶中较低为25.47mg 。 陈海云等用A1C13分光光度法对云南风尾茶中总黄酮的含量进行了分析 , 结果表明风尾茶中黄酮主要集中在叶部 , 根部含量最少 , 全株含量为10.49% 。 而热水浸提凤尾茶的研究未见报道 。 水提取法具有简单易行、安全性高、投入资金少的特点 , 且日常生活中凤尾茶也是以水冲泡进行饮用的 , 所以以水为溶剂提取凤尾茶中的总黄酮具有一定的研究意义 。 与天然产物的传统提取方法比较 , 微波辅助提取技术具有方便、省时、能耗少等优点 , 本实验采用微波辅助的方法 , 以水为溶剂对云南风尾茶中的总黄酮进行提取 , 测定了总黄酮的提取率 , 确定了最佳提取工艺条件 。 并与热水浸提比较 , 证明微波提取法确实是一种高效快捷且浸提率高的方法 。
1材料与方法
l 。 l材料与仪器
凤尾茶采自云南省建水县 。 芦丁对照品 , 购于中国药品生物制品检定所;其他试剂均为分析纯 。 G8023ETL.V8微波炉 , 顺德格兰仕电器有限公司;FA1004电子天平 , 上海天平仪器厂;722光栅分光光度计 , 上海分析仪器厂 。
1.2方法与步骤
l_2.1标准曲线的制定:
凤尾茶中总黄酮含量的测定采用AICI3比色法 。 准确称取在120~C干燥至恒重的芦丁对照品5.0mg , 加无水乙醇溶解 , 定容至100mL容量瓶中 , 摇匀 。 准确地吸取此溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL , 分别置于10mL容量瓶中 , 精密加0.Imol/L的三氯化铝溶液3mL , HAc-NaAc缓冲溶液(pH5.8)定容至刻度 。 放置30min , 用第一瓶溶液作空白 , 在波长420nm处测定吸光度 , 以质量浓度(mg/mL)为横坐标 , 吸光度为纵坐标 , 得回归方程y:0.1076+1.828X.r=0.9978 。
1.2.2样品的提取及总黄酮含量的测定:
凤尾茶全草 , 粉碎 , 过20目筛备用 。 精密称取一定量样品 , 按一定的料液比 , 加入90~C热水并保温30min后 , 放入微波炉中 , 选择适当的功率和时间提取 , 取出定容、过滤 。 精确吸取lmL , 稀释5倍 , 加入试剂和方法同“1.2.1标准溶液的制定” 。 根据所测吸光度和标准曲线得出微波辅助水提法总黄酮的含量 。 总黄酮提取率=(总黄酮质量浓度×定容体积)x5/样品质量×100%
1.2.3提取工艺的单因素考察
1.2.3.1不同料液比对提取率的影响
分别以20、30、40、50、60倍的90℃热水对凤尾茶保温30min后 , 300W微波加热5min , 发现总黄酮的提取率在料液比为1:40时最高 。
1.2.3.2不同微波提取时问对提取率的影响
以40倍热水对样品保温浸提30min后 , 300W微波加热2min、5min、10mill、15min后 , 结果为总黄酮的提取率在加热5min时达到一个峰值 。
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