RAPD 蓝萼香茶菜随机扩增多态DNA反应体系优化

试验以香茶菜属植物的蓝萼香茶菜[Isodon ja ponica (Burm.f.)Hara var.glaucocalyx (Maxim.)]为材料, 采用改进的CTAB法提取基因组DNA, 首次建立适合于蓝萼香茶菜的RAPD(Random amplified polymorphic NDA, 随机扩增的多态性)分析的PCR反应体系 。 通过对RAPD条件优化分析, 确定蓝萼香茶菜RAPD的最佳方案为:25μl反应体系中包括三磷酸脱氧核苷酸(dNTPs)0.1mmol/L, 引物0.4μmol/L, 模板DNA90ng, Taq酶(Sangon)3u, 2.5μ110×buffer缓冲液(含20mmol/L Mg^2+), 其余部分用无菌超纯水补平;PCR扩增循环为93C预变性4min, 93C变性45s, 36C复性75s, 72C延伸2min, 40个循环, 最后72C延伸10min 。 【RAPD 蓝萼香茶菜随机扩增多态DNA反应体系优化】完成机构:齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,黑龙江齐齐哈尔161006

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