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绿茶多糖研究进展( 二 )

茶知识


3、绿茶多糖的纯化技术
绿茶多糖的纯化方法有沉淀法、超滤法、盐析法、柱层析法等 。 目前，研究最多的是DEAE-52纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析两种方法 。 陈海霞以低档绿茶中提取到的茶粗多糖为原料，采用DEAE-52纤维素柱层析进行纯化，经水和0.1mol/L、0.2mol/L、0.5mol/L的NaCl溶液梯度洗脱后，得到TPS-1、TPS-2、TPS-3和TPS-4等4个组分；周宇波采用水热法对中茶108粗老叶中的茶多糖进行提取，采用DEAE-52纤维素柱（4.0～100.0cm）进行纯化，用蒸馏水及不同浓度的NaCl溶液依次进行分段洗脱，得到5个亚组分，分别命名为F0、F0.1、F0.2、F0.3和F0.4；寇小红从龙井43茶树粗老叶中提取的粗多糖，经过不同孔径的超滤膜进行初步纯化，截留液经过DEAE-52纤维素离子交换层析纯化后，得到8个不同的分级组分，其中，5个酸性多糖和3个中性多糖，再经过丙烯葡聚糖凝胶SephacrylS-300柱层析系统进行纯化，得到14个组分 。 综上所述，在所有的常用纯化技术中，DEAE-52纤维素离子交换层析纯化方法效果最好，但是其纯化效果亦与原料有关 。
三、绿茶多糖的结构组成
如前所述，绿茶多糖的糖的部分主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖等组成，大量研究结果表明茶树品种和产地均会影响多糖中单糖的组成 。 经气相色谱分析得到单糖组成，结果详见表1 。
另有研究结果表明，不同提取工艺、脱色方法和纯化技术等对多糖中单糖的组成影响不大 。
四、绿茶多糖的生物活性研究
近年来，科研人员对绿茶多糖生物活性进行了大量研究，主要研究了绿茶多糖的抗氧化、降血糖、抗肿瘤（癌）、提高免疫力等方面 。
1、抗氧化
绿茶多糖具有较强的抗氧化能力，对预防心脑血管疾病和延缓衰老具有重要作用 。 其抗氧化能力主要通过清除自由基、对脂类的氧化抑制和对铁离子的还原能力等来反映 。 目前，绿茶多糖抗氧化活性的评价，主要通过超氧阴离子（O2-·）自由基、羟自由基（·OH）和亚硝基（NO2-）等体外清除活性及铁离子的还原能力来进行研究 。 例如，尹学哲等研究表明，绿茶多糖对ROO·、O2-·、·OH及H2O2均有清除作用；受试者食用绿茶多糖后，血浆及VLDL、LDL和HDL过氧化脂质水平明显降低，在体外进行氧化修饰时，LDL氧化延滞时间明显延长 。 研究结果提示，绿茶多糖可增强血浆及脂蛋白抗氧化能力，起到预防心血管疾病和延缓衰老的作用 。 陈萍等采用不同浓度的乙醇从龙井粗老茶叶中提取到的组分TPS70（70％的乙醇沉淀）抗氧化效果好且得率高，在体外模拟人工胃液环境中，组分TPS70降解为还原糖和寡糖片段，降解片段稳定在120ku左右 。 Fan等采用阴离子交换树脂D315将提取的茶多糖分离成中性茶多糖（TPSI）和酸性茶多糖（TPSII），并对这两种茶多糖进行脱金属离子处理后测定其抗氧化能力 。 结果表明，所有茶多糖均表现出不同程度的抗氧化活性，其中去除金属离子的TPSI抗氧化活性得到大幅提升 。 Ren等通过研究紫阳含硒绿茶SeTPS对小鼠肝氧化应激的影响发现，饲喂SeTPS组的小鼠肝脏脂肪变性和氧化应激损伤明显减轻，抗氧化性和肝脂水平均恢复到正常值 。
2、降血糖
国内外研究发现茶多糖具有显著的降低血糖的作用，并且茶叶越粗老血糖降低效果越好 。 俞东宁等从粗老龙井茶叶中采用水浸提法提取多糖，组分TPS70抗氧化效果最强，而且对糖尿病小鼠的脂多糖升高有显著的抑制作用 。 贾亮亮等分别采用酶法、热水提取法和冷水提取法提取了鄂产绿茶的茶多糖，结果表明3种提取方法获得的绿茶多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用无明显差别；酶法提取的绿茶多糖对α-淀粉酶和蔗糖酶活性的抑制作用强于热水提取法、冷水提取法所得的绿茶多糖，具有较好的体外降血糖活性 。 钟灵等的研究结果表明，恩施绿茶茶多糖能明显降低糖尿病大鼠血糖（FBG），增强超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、肝葡萄糖激酶（GK）的活性，减少血清中丙二醛（MDA）的含量，升高脾脏、胸腺系数，具有降血糖、抗氧化和增强机体免疫功能的作用 。 Wang等研究表明，绿茶中的一种水溶性茶多糖7WA在高葡萄糖水平（25mmol/L）时能够显著增加胰岛素分泌，从而起到良好的抗糖尿病的作用 。 综上所述，茶多糖降血糖的机理主要有：①降低由四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖糖度；②减轻四氧嘧啶对小鼠胰岛的损伤，改善受损β细胞的功能；③清除自由基，提高肝脏抗氧化能力；④调节糖代谢 。

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