文章插图
(一)麦芽汁培养基的配制 1．培养基成分 新鲜麦芽汁一般为10-15波林 。2．配制方法 (1)用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用 。(2)取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全) 。(3) 糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20 m1，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤) 。(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH至6．4 。如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用 。(5)如配固体麦芽汁培养基时，加入2％琼脂，加热融化，补充失水 。(6)分装、加塞、包扎 。(7)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min 。（二)马铃薯葡萄糖培养基的配制 1、培养基成分 马铃薯 20g 葡萄糖 2 g 琼脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH 2．配制方法 (1)配制20％马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000m1 。80℃浸泡lh，用纱布过滤，然后补足失水至所需体积 。100 Pa灭菌20 min 。即成20％马铃薯浸汁，贮存备用 。（2)配制时，按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水 。(3)分装、加塞、包扎 。(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min 。(三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制 1．培养基成分 黄豆芽 10g 葡萄糖 5g 琼脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH 2．配制方法 (1)称新鲜黄豆芽10g，置于烧杯中，再加入100 m1水，小火煮沸30 min，用纱布过滤，补足失水，即制成10％豆芽汁 。（2)配制时，按每100 m1 10％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g琼脂，继续加热融化，补足失水 。(3)分装、加塞、包扎 。(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min 。(四)察氏(czapck)培养基的配制 1．培养基成分 蔗糖 3g NaN03 0.3g K2HP04 0.1g KCl 0.05g MgSO4·7H2O 0.05 g FeS04 0.001 g 琼脂 1.5-2g 蒸馏水 100ml 自然pH 2．配制方法 (1)称量及溶化 量取所需水量约2／3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4 。依次逐一加入水中溶解 。按每100 ml培养基加入1ml 0.1％的FeS04溶液 。（2）定容 候药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加水至所需体积 。（3）加琼脂 加入所需量琼脂，加热融化，补足失水 。(4)分装、加塞、包扎 。(5)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min 。YPD培养基YPD 或YPED，：Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L)，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基 用于酵母菌的培养 配方：1% Yeast Extract（酵母膏），2% Peptone（蛋白胨），2% Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉 配制方法： 1 溶解10gYeast Extract（酵母膏）, 20gPeptone（蛋白胨）于900ml水中，如制平板加入20g琼脂粉 2 高压 121度 20min 3 加入100ml 10×Dextrose (glucose)（葡萄糖），(葡糖糖溶液灭菌后加入) 注：葡萄糖，yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应，导致培养基成分变化，所以要分别灭菌后再混合 。YPEG：除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外，其他成分同YPD
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