根据茶树α-微管蛋白(α-tubulin)的mRNA全长序列(GenBank登录号DQ340766)设计引物 , 以RT-PCR方法扩增茶树α-tubulin基因 , 将扩增产物克隆到原核表达载体pET-32a(+)上 , 并转化至大肠杆菌BL21trxB(DE3)中 , 经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后以包涵体形式表达 。 以纯化后的α-tubulin融合蛋白制备兔多克隆抗体 , 用Westernblot方法检测抗体特异性 。 结果显示α-tubulin蛋白以包涵体形式大量表达 , 以融合蛋白制备的抗体对茶树体内的α-tubulin具有良好的特异性 。 【茶树α-tubulin基因的原核表达及其多克隆抗体的制备】完成机构:安徽农业大学茶叶生物化学与生物技术教育部重点实验室,安徽合肥230036
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