通过PCR扩增E．coli DH5a的γ-ggt基因 ， 产物经纯化后用Kpn I和Xho I双酶切 ， 回收γ-谷氨酰转肽酶基因目的片断 ， 并与经相同双酶切的表达载体pET-32a连接 ， 得到重组质粒pET-GGT 。 将重组质粒转化到E．coli BL21中 ， 获得工程菌 。 工程菌株经0．05mol／L IPTG ， 32℃诱导表达 ， 湿菌体的酶活达到2．0U／g ， 大约是出发菌株E．coli DH5a的15倍 。 工程菌催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到29．40g/L ， L-Gln的转化率为48．22％ ， 其催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力比出发菌株E．coli DH5a提高了100多倍 。 【茶氨酸生物合成工程菌构建】完成机构：农业部茶叶化学工程重点实验室、中国农业科学院茶叶研究所,浙江杭州310008
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