植物组织培养的过程(植物组织培养的过程介绍)

1、将采来的植物材料除去不用的部分 , 将需要的部分仔细洗干净 , 如用适当的刷子等刷洗 。把材料切割成适当大小 , 即灭菌容器能放入为宜 。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时 , 冲洗时间视材料清洁程度而宜 。易漂浮或细小的材料 , 可装入纱布袋内冲洗 。流水冲洗在污染严重时特别有用 。洗时可加入洗衣粉清洗 , 然后再用自来水冲净洗衣粉水 。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物 , 除去脂质性的物质 , 便于灭菌液的直接接触 。当然 , 最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温 。
【植物组织培养的过程(植物组织培养的过程介绍)】
2、对材料的表面浸润灭菌 。要在超净台或接种箱内完成 , 准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等 。用70%酒精浸10~30秒 。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用 , 加之70%酒精穿透力强 , 也很易杀伤植物细胞 , 所以浸润时间不能过长 。有一些特殊的材料 , 如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗 , 多层鳞片的休眠芽等等 , 以及主要取用内部的材料 , 则可只用70%酒精处理稍长的时间 。处理完的材料在无菌条件下 , 待酒精蒸发后再剥除外层 , 取用内部材料 。
3、用灭菌剂处理 。表面灭菌剂的种类较多 , 可根据情况选取1~2种使用见表 。第四步是用无菌水涮洗 , 涮洗要每次3min左右 , 视采用的消毒液种类 , 涮洗3~10次左右 。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意:酒精渗透性强 , 幼嫩材料易在酒精中失绿 , 所以浸泡时间要短 , 防止酒精杀死植物细胞 。老熟材料 , 特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些 , 如种子可以浸泡5分钟 。升汞的渗透力弱 , 一般浸泡10分钟左右 , 对植物材料的杀伤力不大 。漂白粉容易导致植物材料失绿 , 所以对于幼嫩材料要慎用 。在消毒液中加入浓度为0.08~0.12%的吐温20或80(一种湿润剂) , 可以降低植物材料表面的张力 , 达到更好的消毒效果 。

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