1.2.3 染毒、修复 选发育良好、根长一致的蚕豆幼苗插入有孔的培养板中， 置于各试验处理溶液（将烟雾水溶液加热至沸， 添加各茶类， 水浴15 min后冷却用于试验）中， 使根尖完全浸入， 28 ℃下培养6 h后用蒸馏水清洗根尖2次， 再换入新鲜蒸馏水修复培养22 h.
1.2.4 固定保存 切取处理好的根尖， 用新配的卡诺氏固定液（无水乙醇∶冰乙酸＝3∶1）固定24 h后转入体积分数为0.70酒精， 置于4 ℃冰箱保存备检.
1.2.5 染色与观察统计 取固定好的根尖， 用1 mol.L-1 HCl在60 ℃下水解15 min， 后经Schiff试剂染色， 制片镜检， 每组至少观察5个根尖， 每个根尖至少计数1000个细胞， 计算蚕豆根尖细胞微核千分率， 并进行统计分析.
1.2.6 内含物测定 茶多酚含量由酒石酸亚铁分光光度法测定， 儿茶素含量由香荚兰素比色法测定.
2 结果与分析
2.1 不同茶类对香烟烟雾水溶物诱变作用的影响
蚕豆根尖细胞微核率检测的结果表明,在香烟烟雾水溶液中添加不同茶类之后， 其细胞微核率比对照明显下降(表1).t检验t0,1～t0,8表明,处理1至处理8微核率下降均达极显著水平(表2)， 说明各种茶叶均有明显抗烟毒效果.
表1 试验处理及细胞微核率统计1)
Table 1 Treatment and cellular micronuclei frequency
处理序号茶类茶叶用量微核率/‰
(平均值±标准差)g0(CK)无0
41.08±1.341乌龙茶514.14±1.212乌龙茶2.520.84±1.083绿茶512.94±1.714绿茶2.519.59±2.015红茶519.88±0.916红茶2.522.68±0.777白茶519.31±1.568白茶2.523.11±1.09
1)各处理用烟量均为每250 mL蒸馏水中含2支香烟烟雾水溶物.
表2 各处理之间微核率的t检验1)
Table 2 t-test of micronuclei frequency in every treatment
比较项t值比较项t值比较项t值比较项t值t0,133.49**
t1,31.37
t2,41.23
t1,29.26**
t0,226.38**t1,58.51**t2,63.11*t3,45.63**t0,329.01**t1,75.87**t2,83.31*t5,64.70*t0,419.92**t3,5
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