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近年来白芨市场需求量大增 , 价格也逐年攀升 。 由于长期无限制地人工采挖 , 野生白芨资源蕴藏量日趋减少 , 而在人工栽培条件下 , 一般采用分割假鳞茎的方式进行繁殖 , 1个假鳞茎1年仅能形成1~5个新假鳞茎 , 生产效率低 , 经济效益不佳;白芨1个蒴果内含种子数万粒 , 自然条件下极难萌发;而人工无菌播种则能获得很高的萌率 , 可以作为一种规模化生产白芨种苗的方法 。
本技术采用两步培养法 , 对常规兰科植物无菌播种育苗技术进行了一些改进和简化 , 使用改进后的技术白芨播种至炼苗仅需180~240d , 节约了生产成本 , 对促进白芨人工栽培产业发展以及保护野生资源都具有重要的意义 。
【繁殖材料】
白芨人工杂交授粉后120~180d尚未开裂的蒴果内种子 。
【培养条件】
以MS为基本培养基 。
1、种子萌发培养基:
MS+6-BA1mg/L+NAA5mg/L+活性炭1g/L;
2、植株分化及壮苗培养基:MS+6-BA0.25mg/L+NAA1
mg/L+活性炭1g/L+香蕉泥100g/L 。
上述培养基均附加琼脂8g/L和蔗糖30g/L , pH值5.4 。 培养温度(23±2)℃ , 种子播种后采用全暗培养萌发后转入光照培养 , 光照度20~25μmol/m2/s , 光照时间14h/d 。
【生长与分化情况】
1、材料的无菌处理
采收120~180d果龄的白芨蒴果 , 切除花梗和残留柱头、花瓣 , 用70%酒精擦拭干净后浸入1g/LHgCl2溶液中20min , 在超净工作台上以无菌水清洗3~4次 , 吸干水分后剖开蒴果 , 将种子直接撒播于种子萌发培养基(1)上 , 播种密度以铺满培养基、种子间不相互重叠为宜 。
2、种子萌发
播种15d后能看到有少数胚膨大并突破种皮 , 开始萌发 , 转入光照下种子开始变绿(见图1) 。 白芨种子萌发不整齐 , 播种60d后仍有种子萌发 , 经抽样统计 , 播种45d后平均萌发率达71.5% 。 萌发较早的种子在顶端产生1个小突起 , 形成1枚子叶 , 继续培养则顶端伸长并长出1~2枚叶片 。
3、植株分化及壮苗培养
播种60d后 , 白芨种子生长旺盛 , 已长满培养基 , 并在顶端分化出叶片 , 可转接入植株分化及壮苗培养基(2)内 , 注意每瓶接种数量宜少不宜多 , 以每瓶100~200粒为宜 , 既有一定的群体数量 , 又为后期植株的生长留下空间 。 在培养基(2)内 , 白芨种子顶端分为叶片 , 底端逐渐生根 , 生长发育成一株完整的小植株 。 由于种子间遗传差异 , 白芨植株生长速度差异较大 , 培养120d后 , 多数植株高度超过10cm,并在基部形成大小不等的假鳞茎 。
4、炼苗移栽
在培养基(2)内生长120~180d后 , 培养基营养成分基本耗尽 , 白芨植株长满培养瓶 , 此时外界气温逐渐回升 , 当平均气温稳定在10℃以上时 , 就可以炼苗移栽 。
炼苗时 , 先将培养瓶置于炼苗棚内过渡培养15d , 3~4d逐渐揭开瓶盖 , 然后小心取出无菌苗 , 尽量勿伤根、叶 , 洗净培养基 , 将植株拆分开 , 密植于以腐叶土为基质的苗床上 。
【白芨无菌播种育苗技术】栽种后 , 用70%多菌灵1000倍液浇施定根水 , 炼苗棚内温度控制在10~25℃ , 湿度80%以上 , 初期遮去自然光的90%左右 , 每周喷70%多菌灵1000倍液1次 , 每月喷施0.1%磷酸二氢钾和0.05%尿素混合液3次 。 炼苗移栽60d后 , 部分植株有新根、新叶出 , 遮光率可降到70%左右 。
当年秋季倒苗后在基质内形成大小不一的白芨种球 , 可留在炼苗棚内越冬 , 注意覆盖松毛等材料保湿 , 或过筛挑选后在冷库内保存 , 翌年春季即可作为种球供大田种植 。
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